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Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Inmunología
Reacciones de aglutinación
activa
pasiva
AGLUTINACIÓN
Mayor sensibilidad
Técnica basada en la reacción Ag-Ac
Particulado o soluble
Naturaleza química
Afinidad
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Reactividad cruzada
REACCIONES DE
AGLUTINACIÓN
Aglutinación
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Bacterias
Hongos
Parasitos
Células
Cualitativa o
semicuantitativa
Título de aglutininas
POTENCIAL
Z
Es la diferencia de potencial entre el
medio de dispersión y la capa
estacionaria del fluido anexa a la
partícula dispersada
ANTÍGENO
H Ac Aparecen entre los 8-12 días y
pueden persistir por más de un año
ANTÍGENO O. SOMÁTICO
A los 6-8 días del inicio de la enfermedad aparecen los anticuerpos
contra el antígeno O y desaparecen entre tres a seis meses después.
APLICACIONES DE LAS REACCIONES DE
ALUCINACIÓN ACTIVA
Identificación de Ag eritrocitarios (Transfusiones sanguínea)
Identificación y clasificación de microrganismos
Diagnostico
Evolución de una infección
CLASIFICACIÓN DE KAUFFMAN Y
WHITE
La serotipificación esta basada en el esquema, internacionalmente
reconocido, de Kauffmann-White consiste en la caracterización,
generalmente por aglutinación en portaobjetos, de los antígenos
somáticos O, de los antígenos flagelares H y rara vez del antígeno
capsular Vi. Muchos serotipos de Salmonella expresan dos tipos de
antígenos flagelares, denominados tradicionalmente antígenos de
fase 1 y de fase 2. Cada Salmonella expresa alternativamente estos
dos tipos de antígenos mediante un mecanismo denominado "cambio
de fase"4. En la última revisión de este esquema, llevada a cabo por el
Instituto Pasteur (París), en el centro Colaborador de la Organización
Mundial de la Salud (OMS) para la Referencia e Investigación
en Salmonella, se han descrito 2.523 serotipos5.
Un serotipo o serovar es un tipo de microorganismo infeccioso
clasificado según los antígenos que presentan en su superficie
celular.
CLASIFICACIÓN DE KAUFFMAN Y
WHITEPublicado por el centro Colaborador de la OMS de Referencia e
Investigación de Salmonella del Instituto Pasteur
Serotipificaciòn
H (119) H1 H2
O (46)
Vi
Salmonella (subespecie) X, X:L, L: X, X
Salmonella serovariedad Typhimurium, o simplemente Salmonella
Typhimurium
largos como Salmonella enterica, subespecie enterica serovariedad
Typhimurium
REACCIONES FEBRILES
S. Typhi H
S. Typhi O
S. Paratyphi A
S. Paratyphi B
Brucella
Rickttsia (Proteus OX19)
Fiebre Tifoidea
Fiebre paratifiodea
Fiebre de malta o brucelosis
Rickettsiosis
Tíficos
1. Tífico H
2. Tífico O
3. Paratífico A
4. Paratífico B
5. Brucella
6. Proteus OX19
Reacción de Widal
Reacción de Huddleson
Reacción de Weil Felix
Flagelar
Somático
Flagelar
Somático
OBJETIVOS
Obtener el titulo de los antisueros de conejo contra los antígenos “H”
y “O” de Salmonella Choleraesuis por aglutinación en tubo.
Identificar anticuerpos específicos contra agentes infecciosos
causantes de cuadros febriles por aglutinación en placa.
METODOLOGÍ
A
AGLUTINACIÓN BACTERIANA
“H”
“O”
+
0.25 ml de TBS-G
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
13 14 15
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
13 14 15
0.25 mL de suero anti-Ag
“H”
Dil 1:25
0.25 mL de
suero anti-Ag
“O”
0.25
mL
0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
0.25 0.25 0.25
+
0.25 mL Ag
“H”
+
0.25 mL Ag
“O”
Incubar 37°C por
3 h
Refrigeración 24 h
Buscar al fondo del tubo la presencia de
aglutinación
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
13 14 15
0.25
mL
0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
0.25 0.25 0.25
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
13 14 15
Typhi H Typhi O Paratyphi A
Paratyphi B Brucella Proteus
Reacciones febriles
1 gota de
suero
Movimientos
oscilatorios 2
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RESULTADOS
TÍTULO ANTI-H
TÍTULO ANTI- O
EQUIPO TUBO TÍTULO
1 11 51200
3 10 25600
5 12 102400
7 8 64000
EQUIPO TUBO TÍTULO
2 9 512
4 10 1024
6 10 1024
X= 60800
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REACCIONES FEBRILES
CONCLUSIONES
El título para el Ag “H” fue de 1:60800
El título para el Ag “O” fue de 1:583
El título para el Ag “H” fue mayor que para el Ag “O” debido a su
naturaleza química
Las reacciones febriles permiten el diagnóstico rápido de agentes
casuales de infecciones bacterianas por medio de las reacciones de
aglucinación activa.
BIBLIOGRAFÍA
MIGUEL A. GUZMÁN, Y MAYE BERNAL (1999). LAS PRUEBAS SEROLÓGICAS EN EL
DIAGNOSTICO DE LA ENFERMEDAD INFECCIOSA. REV. FAC. MED. UNIVERSIDAD NACIONAL
DE COLOMBIA. VO. 47 NO. 2 PÁGS..(89-97)
VICENTE A. GARCÍA. REACCIONES DE AGLUTINACIÓN. GAC MED MEX VO. 140.
SUPLEMENTO NO. 3 2004 PÁG. 50-51
ANDREW MOULDEN. EL POTENCIAL ZETA Y LA QUÍMICA COLOIDAL.
FIEBRE TIFOIDEA Y OTRAS INFECCIONES POR SALMONELLAS. R. JURADO; C, ARENAS , ET
AL. MEDICINE. 2010; 10(52):3497-501
BRUCELOSIS: ZOONOSIS DE IMPORTANCIA EN MÉXICO. LILIA GUZMÁN; ARACELI
CONTRERAS, ET AL. REV CHILENA INFECTOL 2016:33(6): 656-662
RICKETTSIOSIS CONCEPTOS BÁSICOS. SANTA MARÍA ARCA; REYES GOMEZ. REVSALJAL
2018:2(5): 113-121
NOMENCLATURA DE SALMONELLA. FW BRENNER , RG VILLAR , FJ ANGULO , R. TAUXE , B.
SWAMINATHAN. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY. 2000. 38 (7):2465-2467
LAVALETT, LELIA ET AL. DESARROLLO Y VALIDACIÓN DE UNA REACCIÓN EN CADENA DE LA
POLIMERASA MÚLTIPLE PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS SEROGRUPOS SALMONELLA
ENTÉRICA B, C2, D Y E DE SALMONELLA ENTÉRICA. BIOMÉDICA [ONLINE]. 2009, VOL.29,
N.2, PP.244-252. ISSN 0120-4157.
LABANINO MULET, NIURKA Y RODRIGUEZ MELENDEZ, SUSANA VICTORIA. TEST DE WIDAL
¿ES ÚTIL PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA FIEBRE TIFOIDEA?. CCM [ONLINE]. 2013, VOL.17,
N.2, PP.199-201. ISSN 1560-4381.
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Aglutinacion activa

  • 1. Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Inmunología Reacciones de aglutinación activa
  • 3. AGLUTINACIÓN Mayor sensibilidad Técnica basada en la reacción Ag-Ac Particulado o soluble Naturaleza química Afinidad Especificidad Reactividad cruzada
  • 6. POTENCIAL Z Es la diferencia de potencial entre el medio de dispersión y la capa estacionaria del fluido anexa a la partícula dispersada
  • 7.
  • 8. ANTÍGENO H Ac Aparecen entre los 8-12 días y pueden persistir por más de un año
  • 9. ANTÍGENO O. SOMÁTICO A los 6-8 días del inicio de la enfermedad aparecen los anticuerpos contra el antígeno O y desaparecen entre tres a seis meses después.
  • 10. APLICACIONES DE LAS REACCIONES DE ALUCINACIÓN ACTIVA Identificación de Ag eritrocitarios (Transfusiones sanguínea) Identificación y clasificación de microrganismos Diagnostico Evolución de una infección
  • 11. CLASIFICACIÓN DE KAUFFMAN Y WHITE La serotipificación esta basada en el esquema, internacionalmente reconocido, de Kauffmann-White consiste en la caracterización, generalmente por aglutinación en portaobjetos, de los antígenos somáticos O, de los antígenos flagelares H y rara vez del antígeno capsular Vi. Muchos serotipos de Salmonella expresan dos tipos de antígenos flagelares, denominados tradicionalmente antígenos de fase 1 y de fase 2. Cada Salmonella expresa alternativamente estos dos tipos de antígenos mediante un mecanismo denominado "cambio de fase"4. En la última revisión de este esquema, llevada a cabo por el Instituto Pasteur (París), en el centro Colaborador de la Organización Mundial de la Salud (OMS) para la Referencia e Investigación en Salmonella, se han descrito 2.523 serotipos5.
  • 12. Un serotipo o serovar es un tipo de microorganismo infeccioso clasificado según los antígenos que presentan en su superficie celular.
  • 13. CLASIFICACIÓN DE KAUFFMAN Y WHITEPublicado por el centro Colaborador de la OMS de Referencia e Investigación de Salmonella del Instituto Pasteur Serotipificaciòn H (119) H1 H2 O (46) Vi Salmonella (subespecie) X, X:L, L: X, X Salmonella serovariedad Typhimurium, o simplemente Salmonella Typhimurium largos como Salmonella enterica, subespecie enterica serovariedad Typhimurium
  • 14.
  • 15.
  • 16.
  • 17.
  • 18. REACCIONES FEBRILES S. Typhi H S. Typhi O S. Paratyphi A S. Paratyphi B Brucella Rickttsia (Proteus OX19) Fiebre Tifoidea Fiebre paratifiodea Fiebre de malta o brucelosis Rickettsiosis
  • 19. Tíficos 1. Tífico H 2. Tífico O 3. Paratífico A 4. Paratífico B 5. Brucella 6. Proteus OX19 Reacción de Widal Reacción de Huddleson Reacción de Weil Felix Flagelar Somático Flagelar Somático
  • 20. OBJETIVOS Obtener el titulo de los antisueros de conejo contra los antígenos “H” y “O” de Salmonella Choleraesuis por aglutinación en tubo. Identificar anticuerpos específicos contra agentes infecciosos causantes de cuadros febriles por aglutinación en placa.
  • 22. AGLUTINACIÓN BACTERIANA “H” “O” + 0.25 ml de TBS-G 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
  • 23. 0.25 mL de suero anti-Ag “H” Dil 1:25 0.25 mL de suero anti-Ag “O” 0.25 mL 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 + 0.25 mL Ag “H” + 0.25 mL Ag “O” Incubar 37°C por 3 h Refrigeración 24 h Buscar al fondo del tubo la presencia de aglutinación 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 0.25 mL 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
  • 24. Typhi H Typhi O Paratyphi A Paratyphi B Brucella Proteus Reacciones febriles 1 gota de suero Movimientos oscilatorios 2 min.
  • 25. RESULTADOS TÍTULO ANTI-H TÍTULO ANTI- O EQUIPO TUBO TÍTULO 1 11 51200 3 10 25600 5 12 102400 7 8 64000 EQUIPO TUBO TÍTULO 2 9 512 4 10 1024 6 10 1024 X= 60800 X=583
  • 27. CONCLUSIONES El título para el Ag “H” fue de 1:60800 El título para el Ag “O” fue de 1:583 El título para el Ag “H” fue mayor que para el Ag “O” debido a su naturaleza química Las reacciones febriles permiten el diagnóstico rápido de agentes casuales de infecciones bacterianas por medio de las reacciones de aglucinación activa.
  • 28. BIBLIOGRAFÍA MIGUEL A. GUZMÁN, Y MAYE BERNAL (1999). LAS PRUEBAS SEROLÓGICAS EN EL DIAGNOSTICO DE LA ENFERMEDAD INFECCIOSA. REV. FAC. MED. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA. VO. 47 NO. 2 PÁGS..(89-97) VICENTE A. GARCÍA. REACCIONES DE AGLUTINACIÓN. GAC MED MEX VO. 140. SUPLEMENTO NO. 3 2004 PÁG. 50-51 ANDREW MOULDEN. EL POTENCIAL ZETA Y LA QUÍMICA COLOIDAL. FIEBRE TIFOIDEA Y OTRAS INFECCIONES POR SALMONELLAS. R. JURADO; C, ARENAS , ET AL. MEDICINE. 2010; 10(52):3497-501 BRUCELOSIS: ZOONOSIS DE IMPORTANCIA EN MÉXICO. LILIA GUZMÁN; ARACELI CONTRERAS, ET AL. REV CHILENA INFECTOL 2016:33(6): 656-662 RICKETTSIOSIS CONCEPTOS BÁSICOS. SANTA MARÍA ARCA; REYES GOMEZ. REVSALJAL 2018:2(5): 113-121 NOMENCLATURA DE SALMONELLA. FW BRENNER , RG VILLAR , FJ ANGULO , R. TAUXE , B. SWAMINATHAN. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY. 2000. 38 (7):2465-2467 LAVALETT, LELIA ET AL. DESARROLLO Y VALIDACIÓN DE UNA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA MÚLTIPLE PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS SEROGRUPOS SALMONELLA ENTÉRICA B, C2, D Y E DE SALMONELLA ENTÉRICA. BIOMÉDICA [ONLINE]. 2009, VOL.29, N.2, PP.244-252. ISSN 0120-4157. LABANINO MULET, NIURKA Y RODRIGUEZ MELENDEZ, SUSANA VICTORIA. TEST DE WIDAL ¿ES ÚTIL PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA FIEBRE TIFOIDEA?. CCM [ONLINE]. 2013, VOL.17, N.2, PP.199-201. ISSN 1560-4381. ANTIGENIC FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS 2007 9TH EDITION. OMS (INTITUT PASTEUR)

Notas del editor

  1. Familia: Enterobateriacae Bacilos Gram negativos anaerobios facultativos