CONSUMO DE GLUCOSA EN ANAEROBIOSIS Y

AEROBIOSIS POR
Saccharomyces cerevisiae

Elaborado por:
Ms. VICTOR MANUEL CASTRO MALABRIGO 2020
I. INTRODUCCIÓN
DEFINICIONES

Catabolismo: proceso orgánico mediante el cual moléculas complejas se simplifican a sus formas más sencillas,
liberando energía que luego es usada para diferentes tejidos u órganos del organismo
 Catabolismo

Respiración Fermentación
Oxidación total de la materia Oxidación parcial de la materia orgánica
orgánica Los productos de reacción contienen todavía energía
Los productos de reacción no Se libera poca energía
contienen energía El aceptor final de electrones es una molécula
Se libera toda la energía orgánica

Aerobia Anaerobia Alcohólica Lactica

Aceptor final el Aceptor final

O2 molécula
inorgánica
distinta del O2
I. INTRODUCCIÓN

DEFINICIONES
ATP: es una molécula altamente energética que es sintetizada a partir del catabolismo de moléculas como
glucosa, lípidos, y rara vez proteínas. El ATP es la principal fuente de energía para las diferentes funciones
celulares como la síntesis de otras moléculas, el transporte a través de las membranas celulares, entre muchas
otras funciones.
I. INTRODUCCIÓN

DEFINICIONES
Respiración anaerobia: es un proceso metabólico, en ausencia del oxígeno, donde ocurre la oxidoreducción de
compuestos como nitratos, sulfatos, dióxido de carbono, entre otros diferentes al oxígeno
Fermentación: proceso biológico que ocurre en condiciones anaeróbiosis donde se lleva a cabo una
oxidorreducción de la molécula energética NADH, la cual conllevará a la síntesis de ATP en menor cantidad que
la respiración aerobia. La fermentación puede ocurrir en organismos aerobios como anaerobios, solamente que
no se utilizará el oxígeno.

NAD

NADH
FADH2
I. INTRODUCCIÓN

DEFINICIONES
Fermentación alcohólica: proceso anaerobio realizado por algunos microorganismos que procesan carbohidratos
para producir ATP y además producen compuestos de desecho como dióxido de carbono y etanol. Tiene un
amplio empleo en la industria alimenticia, como por ejemplo es utilizada para la elaboración de panes, vinos,
cervezas etc.

ALCOHOL

ALDEHIDO

CARBOXILICO

CO2
 I. INTRODUCCIÓN

Saccharomyces cerevisiae

Es un microorganismo facultativo que

emplea la respiración aerobia al igual que
la fermentación alcohólica para
metabolizar la glucosa como fuente de
energía y de carbono.

Es la especie de levaduras utilizada por

excelencia para la obtención de etanol a
nivel industrial debido a que es un
microorganismo de fácil manipulación y
recuperación
 I. INTRODUCCIÓN
Saccharomyces cerevisiae puede llevar a cabo
Metabolismo de Saccharomyces cerevisiae un metabolismo respiratorio o fermentativo de
acuerdo con concentración de oxígeno.

En condiciones aerobias aumenta la biomasa y

produce poco alcohol

En condiciones anaerobiosis el crecimiento

celular es lento y la producción de etanol es alta.

Por esta razón, la oxidación completa de la fuente

de carbono a CO2 y H2O presenta una producción
celular óptima, donde el oxígeno es el aceptor
final de electrones en la fosforilación oxidativa
durante la respiración.

Es así, que en concentraciones altas de oxígeno

disuelto la fermentación de azúcar a etanol es
inhibida.

Esta situación fue observada por Pasteur en

1967, y se denomina el efecto Pasteur .
 I. INTRODUCCIÓN
El efecto Pasteur

Cuando los cultivos anaerobios de levaduras que metabolizaban

glucosa se exponían al aire, se reducía drásticamente la tasa de
utilización de glucosa.
Se obtiene mucha más energía a partir de la oxidación completa de
la glucosa que sólo a partir de la glucólisis.
El efecto Pasteur se produce en microorganismos capaces de
realizar metabolismo fermentador y respiración aerobia (anaerobios
facultativos).
En presencia de O2 utilizan la respiración aeróbia, pero pueden
emplear la fermentación si no hay O2 libre en su medio ambiente.
Pasteur fué el primero en observar que el azúcar es convertido en
alcohol y CO2 por levaduras en ausencia de aire, y que en
presencia de aire se forma muy poco o nada de alcohol, siendo el
CO2 el principal producto final de esta reacción aeróbica. Este
efecto indica el mayor rendimiento energético de la respiración
sobre la fermentación.
 I. INTRODUCCIÓN

Respiración
aerobia
I. INTRODUCCIÓN Balance de los procesos de la respiración aerobia

Proceso Sustancia inicial Sustancia final Coenzimas reducidas y ATP totales

ATP
Glucolisis Glucosa 2 ácido pirúvico 2 NADH 5 ATP
2ATP 2ATP
Descarboxilación del 2 ácido pirúvico 2 acetil Co- A 2 NADH 5 ATP
ácido pirúvico 2 CO2
Ciclo de Krebs 2 Acetil Co-A 4 CO2 6 NADH 15 ATP
2 FADH2 3 ATP
2 GTP 2 ATP
Balance global Glucosa 6CO2 32 (30 ATP)
6CO2 6H2O

C-C-C-C-C-C C₆H₁₂O₆
 I. INTRODUCCIÓN

Fermentación
alcohólica
I. INTRODUCCIÓN

+2 +1

ALCOHOL

ALDEHIDO

CARBOXILICO

CO2
precipitado rojo-ladrillo
I. INTRODUCCIÓN

Cu+1 (red) Cu+2 (oxi)

óxido cuproso

Ind (oxi) Ind (red)

Solución fosfomolibdica Solución fosfomolibdica

ácido fosfomolíbdico ácido fosfomolíbdoso

Objetivo

La presente experiencia práctica de laboratorio, tiene como finalidad la

demostración del consumo de glucosa en anaerobiosis y aerobiosis por
Saccharomyces cerevisiae (levadura de pan o vino).
II. MATERIAL Y MÉTODOS
1.- MATERIALES.
II. MATERIAL Y MÉTODOS
1.- MATERIALES.

❑Buffer de acetato 0.1 M pH 5

❑Glucosa 0.2 M.
❑Ácido sulfúrico 2/3 N.
❑Tungstato de sodio 10 %
❑Solución cúprico alcalina.
❑Solución fosfomolibdica.
❑Agua destilada.
2.- MÉTODOS.
A.- SISTEMA DE INCUBACIÓN:
anaerobiosis

aerobiosis
12.0 mL Buffer 1.8 mL Glucosa 0.2 1.5 mL
acetato 0.1 M M en buffer acetato Suspensión de
pH 5 0.1 M pH 4.6 levadura 10% en
buffer acetato
2.- MÉTODOS.
A.- SISTEMA DE INCUBACIÓN ANAEROBIO:

tomar una
alícuota de 1 mL 1 mL de H2SO4
2/3 N t=0 1 mL de H2SO4
2/3 N

tomar una
alícuota de 1 mL

extraer el aire con una bomba incubación,

de vacío durante 3 a 5 minutos durante
una hora

t=60
2.- MÉTODOS.
A.- SISTEMA DE INCUBACIÓN AEROBIO:

tomar una
alícuota de 1 mL 1 mL de H2SO4
2/3 N t=0 1 mL de H2SO4
2/3 N

tomar una
alícuota de 1 mL

extraer el aire con una bomba incubación,

de vacío durante 3 a 5 minutos durante
una hora

t=60
2.- MÉTODOS.
A.- SISTEMA DE INCUBACIÓN
ANAEROBIO:
mezclar por
agregar 7 mL de agua inversión y
destilada filtrar.

1 mL de
tungstato de
dejar en reposo

t=0
sodio
por 2 minutos
(Na WO ) al 10
2 4

%.
Mezclar vigorosamente,
dejar en reposo por 2
minutos

agregar 7 mL de agua
destilada mezclar por
inversión y
filtrar.

1 mL de
dejar en reposo
tungstato de

t=60 sodio
por 2 minutos
(Na WO ) al 10
2 4

%.
Mezclar vigorosamente,
dejar en reposo por 2
minutos
2.- MÉTODOS.
A.- SISTEMA DE INCUBACIÓN
AEROBIO:
mezclar por
agregar 7 mL de agua inversión y
destilada filtrar.

1 mL de
tungstato de
dejar en reposo

t=0
sodio
por 2 minutos
(Na WO ) al 10
2 4

%.
Mezclar vigorosamente,
dejar en reposo por 2
minutos

agregar 7 mL de agua
destilada mezclar por
inversión y
filtrar.

1 mL de
dejar en reposo
tungstato de

t=60 sodio
por 2 minutos
(Na WO ) al 10
2 4

%.
Mezclar vigorosamente,
dejar en reposo por 2
minutos
 B.DETERMINACIÓN DEL AZUCAR RESIDUAL:
El azúcar residual se determinara con los filtrados del paso 5, utilizando el siguiente sistema:

Anaerobio 1 ml 0,1 ml 0,1 ml

Aerobio 1 ml 0,1 ml 0,1 ml

Agua Agua
destilada B I II destilada B I II

0,5 ml 0,5 ml
t=0 t=0

I I

0,5 ml 0,5 ml

t=60
II t=60 II
 B.DETERMINACIÓN DEL AZUCAR RESIDUAL:
El azúcar residual se determinara con los filtrados del paso 5, utilizando el siguiente sistema:
Anaerobio Aerobio
t=0 t=60 t=0 t=60
1 ml 1 ml 1ml 1 ml 1 ml 1ml
Solución
cúprico
alcalina

B I II B I II

Mezclar y colocar en baño de agua hirviendo por 8 minutos. Al Mezclar y colocar en baño de agua hirviendo por 8 minutos. Al
termino de este tiempo enfriar en agua corriente termino de este tiempo enfriar en agua corriente
 B.DETERMINACIÓN DEL AZUCAR RESIDUAL:
El azúcar residual se determinara con los filtrados del paso 5, utilizando el siguiente sistema:
Anaerobio
t=0 t=60

7ml
1 ml 1 ml 1ml
Solución
fosfomolíbdica
B Agua
I II
destilada

mezclar enérgicamente y dejar en reposo 3 minutos

 B.DETERMINACIÓN DEL AZUCAR RESIDUAL:
El azúcar residual se determinara con los filtrados del paso 5, utilizando el siguiente sistema:
Aerobio
t=0 t=60

7ml
1 ml 1 ml 1ml
Solución
fosfomolíbdica
B Agua
I II
destilada

mezclar enérgicamente y dejar en reposo 3 minutos

3. RESULTADOS

ANAEROBIO AEROBIO
B I II B I II